PRUEBA COOMBS INDIRECTA
UNIVERSIDAD DEL VALLE
FACULTAD DE SALUD
ESCUELA DE BACTERIOLOGÍA Y LABORATORIO CLÍNICO
INFORME LABORATORIO COOMBS INDIRECTO
PAOLA ANDREA LUCUMI MOSQUERA
SANTIAGO DE CALI, JUEVES 7 DE DICIEMBRE DE 2017
UNIVERSIDAD DEL VALLE
FACULTAD DE SALUD
ESCUELA DE BACTERIOLOGÍA Y LABORATORIO CLÍNICO
INFORME LABORATORIO COOMBS INDIRECTO
PAOLA ANDREA LUCUMI MOSQUERA
PROFESORA
GLORIA PATRICIA HERRERA
SANTIAGO DE CALI, JUEVES 7 DE DICIEMBRE DE 2017
TABLA DE CONTENIDO
INTRODUCCIÓN
Prueba de antiglobulina indirecta o coombs indirecto detecta la especialidad de un anticuerpo incompleto que, al unirse a un antígeno celular correspondiente, In Vitro, no es capaz de aglutinarlo directamente sino, que se necesita la antiglobulina humana para conseguir la aglutinación y así comprobar la existencia del anticuerpo. En otras palabras, lo que se quiere detectar es la presencia de anticuerpos irregulares libres en suero ya sea con la técnica clásica de aglutinación en tubo o en gel permite identificar la presencia de anticuerpos antieritrocitarios.
La importancia de la prueba de coombs indirecta se basa en realizar una correcta transfusión para así evitar reacciones post transfusionales.
OBJETIVOS
GENERAL
Comprender la técnica e importancia de la prueba de antiglobulina humana indirecta, sus funciones y su valor diagnostico en el proceso de transfusión
ESPECIFICO
- Analizar los resultados de la prueba AGID y correlacionarlos con la sintomatología del paciente
- Entender los resultados negativos, su comportamiento y el por qué pueden darse
- Realizar la prueba de AGID, reportar su resultado y encontrar una unidad sanguínea que sea la correcta para transfundirse
COOMB INDIRECTO
La prueba de antiglobulina indirecta o coombs indirecto se basa en determinar la sensibilización In Vitro
de los hematíes con moléculas de anticuerpos no aglutinantes IgG y/o fracciones del complemento (C3d).
En otras palabras, es detectar en el suero de los donantes la presencia de Ac irregulares de tipo IgG e IgM,
mediante el uso de glóbulos rojos que poseen antígenos conocidos. La característica fisicoquímica de los
anticuerpos en estudio hace necesario la utilización de temperaturas y medios de reacción diferentes para
su optima detección. En la prueba los eritrocitos y el suero que contiene los anticuerpos y el complemento
son incubados bajo la acción de un potenciador que generalmente es la solución LISS.
de los hematíes con moléculas de anticuerpos no aglutinantes IgG y/o fracciones del complemento (C3d).
En otras palabras, es detectar en el suero de los donantes la presencia de Ac irregulares de tipo IgG e IgM,
mediante el uso de glóbulos rojos que poseen antígenos conocidos. La característica fisicoquímica de los
anticuerpos en estudio hace necesario la utilización de temperaturas y medios de reacción diferentes para
su optima detección. En la prueba los eritrocitos y el suero que contiene los anticuerpos y el complemento
son incubados bajo la acción de un potenciador que generalmente es la solución LISS.
En la prueba de antiglobulina indirecta o coombs indirecto puede estar involucrado uno de los tres
eventos siguientes:
Que los hematíes utilizados sean de composición antigénica conocida, mientras que el suero corresponda
a un individuo en quien la presencia de anticuerpos contra los antígenos eritrocitarios es desconocida.
Las células de composición antigénica conocida se obtienen comercialmente como “células pantalla”
(células I y II) y panel de células para la identificación de anticuerpos inesperados. Ej: Rastreo de
anticuerpos irregulares.
Los hematíes utilizados son de composición antigénica desconocida, es decir, pertenece a un individuo
al cual queremos determinar la presencia de un antígeno específico, por su parte el suero es comercial y
de él se sabe la especificidad del anticuerpo que contieneN
Los eritrocitos son de composición antigénica desconocida y en el suero no sabemos si existen anticuerpos
inesperados o irregulares contra los antígenos eritrocitarios. Ej. Cuando se realizan las pruebas cruzadas,
en la cual se hace reaccionar hematíes del donante con suero o plasma del receptor (prueba cruzada mayor
eventos siguientes:
Que los hematíes utilizados sean de composición antigénica conocida, mientras que el suero corresponda
a un individuo en quien la presencia de anticuerpos contra los antígenos eritrocitarios es desconocida.
Las células de composición antigénica conocida se obtienen comercialmente como “células pantalla”
(células I y II) y panel de células para la identificación de anticuerpos inesperados. Ej: Rastreo de
anticuerpos irregulares.
Los hematíes utilizados son de composición antigénica desconocida, es decir, pertenece a un individuo
al cual queremos determinar la presencia de un antígeno específico, por su parte el suero es comercial y
de él se sabe la especificidad del anticuerpo que contieneN
Los eritrocitos son de composición antigénica desconocida y en el suero no sabemos si existen anticuerpos
inesperados o irregulares contra los antígenos eritrocitarios. Ej. Cuando se realizan las pruebas cruzadas,
en la cual se hace reaccionar hematíes del donante con suero o plasma del receptor (prueba cruzada mayor
Caso clínico
Paciente hemoclasificado como AB+ y fenotipado como homocigoto cc y heterocigoto Ee (ccEe) se le realiza rastreo de Ac irregulares, identificación de Ac y prueba cruzada mayor con tres unidades sanguíneas:
- AB+ ccEe
- O- ccee
- O+ CcEe
Se realizan pruebas para identificar con cual unidad debe ser transfundido el donante.
Rastreo de Ac irregulares
Los anticuerpos irregulares corresponden a aquellos anticuerpos distintos a los anticuerpos naturales
del sistema ABO, que pueden aparecer en respuesta a la exposición a un antígeno eritrocitario extraño
(transfusión o trasplante), por incompatibilidad materno-fetal o sin un estímulo identificable. En algunos
casos, su presencia se asocia a la exposición a antígenos ambientales, bacterianos o virales de
características bioquímicas similares a los antígenos eritrocitarios.
del sistema ABO, que pueden aparecer en respuesta a la exposición a un antígeno eritrocitario extraño
(transfusión o trasplante), por incompatibilidad materno-fetal o sin un estímulo identificable. En algunos
casos, su presencia se asocia a la exposición a antígenos ambientales, bacterianos o virales de
características bioquímicas similares a los antígenos eritrocitarios.
La detección e identificación de anticuerpos irregulares habitualmente se realiza mediante técnicas de
aglutinación en tubo, en columna o en microplaca, con etapas a temperatura ambiente, 37°C y
antiglobulina humana. En algunas ocasiones y de acuerdo a condiciones observadas en cada laboratorio,
se puede realizar análisis a 4°C frente a la sospecha de crioaglutininas. Cuando se detecta la presencia de
un aloanticuerpo, se debe determinar su especificidad mediante la identificación y la consiguiente
deducción de su significado clínico
aglutinación en tubo, en columna o en microplaca, con etapas a temperatura ambiente, 37°C y
antiglobulina humana. En algunas ocasiones y de acuerdo a condiciones observadas en cada laboratorio,
se puede realizar análisis a 4°C frente a la sospecha de crioaglutininas. Cuando se detecta la presencia de
un aloanticuerpo, se debe determinar su especificidad mediante la identificación y la consiguiente
deducción de su significado clínico
Se realiza a pacientes politransfundidos, madres multíparas y pacientes con enfermedades autoinmunes
y a todo quien necesita transfusión para asegurar la ausencia o determinar la presencia de Ac irregulares
que pueden desencadenar una reacción post-transfusional. Aquí se utilizan dos tipos de células (I y II)
con las cuales se hace reaccionar el suero del paciente, cada una con Ag conocidos.
y a todo quien necesita transfusión para asegurar la ausencia o determinar la presencia de Ac irregulares
que pueden desencadenar una reacción post-transfusional. Aquí se utilizan dos tipos de células (I y II)
con las cuales se hace reaccionar el suero del paciente, cada una con Ag conocidos.
En el rastreo de Ac irregulares de nuestro paciente encontramos:
 |  |
Resultados: Célula I 2+ y Célula II – → Rastreo de Ac positivos
De allí pasamos a la identificación de Ac mediante el panel de células conocidas.
Identificación de Ac
En la identificación de Ac identificamos ya sean Ac fríos o calientes usando una AGH poliespecífico en
un pool o panel de 11 células cada una con Ag conocidos, en donde según los resultados de aglutinación
identificamos el Ag en específico que se encuentra en el suero del paciente y que es culpable de la
de la prueba de rastreos de Ac irregulares.
un pool o panel de 11 células cada una con Ag conocidos, en donde según los resultados de aglutinación
identificamos el Ag en específico que se encuentra en el suero del paciente y que es culpable de la
de la prueba de rastreos de Ac irregulares.
Los resultados de nuestro paciente fueron: Célula 1 (+) célula 2 (-) Célula 3 (-) Célula 4 (2+)
Célula 5 (2+) Célula 6 (3+) Célula 7 (-) Célula 8 (-) Célula 9 (2+) Célula 10 (-) Célula 11 (2+) Autocontrol
(-)→ Ac detectado Sistema Duffy Fya
Célula 5 (2+) Célula 6 (3+) Célula 7 (-) Célula 8 (-) Célula 9 (2+) Célula 10 (-) Célula 11 (2+) Autocontrol
(-)→ Ac detectado Sistema Duffy Fya
 |  |
Fenotipificación
Los resultados de la prueba fue C-; Cw-; c 4+; E 4+; e 3+; Kell -. La fenotipificación del paciente
fue ccEe. → Homocigoto para cc y heterocigoto para Ee
fue ccEe. → Homocigoto para cc y heterocigoto para Ee
 |  |
Pruebas cruzadas
Las pruebas cruzadas y la búsqueda de anticuerpos son de suma importancia, ya que permiten que
los Ag y Ac puedan ser detectados y estudiados en el laboratorio que son de gran ayudan a prevenir
la transfusión de sangre incompatible, y proveen al paciente de máxima seguridad y beneficio.
los Ag y Ac puedan ser detectados y estudiados en el laboratorio que son de gran ayudan a prevenir
la transfusión de sangre incompatible, y proveen al paciente de máxima seguridad y beneficio.
Prueba cruzada mayor (PCM)
En esta prueba se investiga en el suero del receptor los posibles Ac frente Ag eritrocitarios de una
unidad de sangre. Es decir, se observa la aglutinación eritrocitaria en una mezcla in vitro del suero
del paciente y los eritrocitos del donante. Cuando no hay aglutinación la PCM es negativa para esa unidad
específica, hay compatibilidad entre receptor y donante y la unidad se puede administrar.
unidad de sangre. Es decir, se observa la aglutinación eritrocitaria en una mezcla in vitro del suero
del paciente y los eritrocitos del donante. Cuando no hay aglutinación la PCM es negativa para esa unidad
específica, hay compatibilidad entre receptor y donante y la unidad se puede administrar.
Prueba cruzada menor (PCMe)
Se enfrenta el suero del donante con los hematíes del receptor. Solo se hace cuando se transfunde
una gran cantidad de plasma, ya que, en este caso, la presencia de Ac en la sangre del donante puede ser
peligrosa.
una gran cantidad de plasma, ya que, en este caso, la presencia de Ac en la sangre del donante puede ser
peligrosa.
Se realiza la PCM al paciente y se obtienen los siguientes resultados:
O- ccee
 |
O+ CcEe
 |
AB + ccEe
 |
Vemos que la unidad a transfundir va a ser la número
1 AB+ ccEe, la cual no presento reacción (Aglutinación) en la prueba |
PREGUNTAS
Definición de conceptos
Aloanticuerpo: anticuerpo producido en un individuo que está dirigido contra antígenos eritrocitarios que él carece, presentes en otro individuo de su misma especie.
Autoanticuerpo: anticuerpo producido en un individuo que está dirigido contra antígenos que expresan sus propios eritrocitos.
Identificación básica de anticuerpos irregulares: procedimiento del laboratorio de inmunohematología que permite identificar la especificidad de la mayoría de los anticuerpos eritrocitarios de importancia clínica, detectados en el TAI. Involucra el uso de células panel de identificación básico y técnicas con potenciadores de reacción (suero antiglobulina humana poliespecífico y solución LISS), que permiten determinar la especificidad de anticuerpos únicos o algunas mezclas de anticuerpos
- Diferencias entre una prueba AGD y una AGID
La diferencia radica en que la AGD detecta Ac fijado en in vivo en el paciente, mientras que la AGID detecta Ac del suero del paciente que se unen a Ag eritrocitarios in vitro.
- Interpretación de detección de Ac y pruebas cruzadas
A) Anticuerpos negativos y prueba cruzada compatible→ Una detección de anticuerpos negativa no garantiza que el suero se encuentre libre de anticuerpos eritrocitarios clínicamente significativos, sólo indica que no contiene anticuerpos reactivos. Tampoco una prueba cruzada compatible indica una supervivencia eritrocitaria normal, por ello debe realizarse conjuntamente con una identificación o tamiz para anticuerpos, o bien diferentes técnicas tanto para anticuerpos como pruebas cruzadas
B) La detección de anticuerpos, las pruebas cruzadas o ambas pueden ser positivas. Lo anterior puede deberse a la presencia de aloanticuerpos, autoanticuerpos, interacciones adversas con reactivos y formación de rouleaux. Si hay múltiples anticuerpos o un anticuerpo que reacciona con un antígeno de alta incidencia o si el anticuerpo está presente en concentraciones muy bajas deben usarse técnicas específicas como elusión, absorción o la combinación de las mismas.
C) Prueba cruzada incompatible, anticuerpos irregulares negativos. Se puede presentar cuando la concentración del anticuerpo es muy baja y sólo se detecta con células frescas, también ocurre cuando las células del panel de eritrocitos de fenotipo conocido no tienen el antígeno de la población en estudio
- Ac irregulares de importancia clínica
BIBLIOGRAFÍA
- Zavala R; Importancia de las pruebas cruzadas y de la búsqueda de anticuerpos. Rev Med Inst Mex Seguro Soc ( Supl): 43-46
- Luna, J; Anticuerpos irregulares, su importancia en medicina transfusional. Rev med Inst Mex Seguro Soc 2005; 43 (supl 1) 17-20
- López, J; Zavala, R; Luna G; Montes, M; Sánchez, R; Chávez M. Investigación en el trabajo diario de inmunohematología. Fenotipos eritrocitarios y protocolo para encontrar sangre compatible en pacientes con aloanticuerpos antieritrocitos Rev Gac Méd Méx Vol.143 Supl 2, 2007 Pag 23-27.
Comentarios
Publicar un comentario